| 目的研究盐酸药根碱(JAT)对NCI-H716细胞分泌GLP-1的促进作用,并初步阐明JAT恢复内源性GLP-1分泌作用与AMPK/PKC信号通路相关。方法采用CCK-8法检测不同浓度JAT(6、30、60、90、150、300μmol/L)对NCI-H716细胞活性的影响,筛选150μmol/L JAT作为本实验基本浓度。分别选择JAT低、中、高浓度(100、150、200μmol/L)、150μmol/L JAT+不同浓度抑制剂Dorsomorphin(2、10、50μmol/L)、150μmol/L JAT+不同浓度抑制剂Chelerythrine(2、10μmol/L)对NCI-H716细胞进行干预,采用CCK-8方法检测细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定GLP-1含量,RT-PCR法检测GLP-1mRNA水平,Western blot法检测GLP-1蛋白表达。结果 JAT可促进NCIH716细胞分泌GLP-1(P<0.05);AMPK通路抑制剂Dorsomorphin和PKC通路抑制剂Chelerythrine均可抑制JAT的作用(P<0.05),且抑制剂Dorsomorphin的作用具有浓度依赖性 |