| 目的 探讨祛湿化痰除痹方抑制类风湿关节炎合并间质性肺病(rheumatoidarthritiswithinterstitiallungdisease,RA-ILD)小鼠模型肺纤维化的作用机制。方法 结合胶原诱导关节炎(collagen-inducedarthritis,CIA)和博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化模型,构建CIA-BLM 模型。将32只DBA/1雄性小鼠随机分为4组,即对照组、CIA-BLM 组、祛湿化痰除痹方低剂量(简称CB-L)组、祛湿化痰除痹方高剂量(简称CB-H)组,每组8只。CB-L组给予祛湿化痰除痹方4.26g/(kg·d)灌胃,CB-H 组给予祛湿化痰除痹方8.52g/(kg·d)灌胃,对照组及CIA-BLM 组则给予等体积的生理盐水,通过检测并比较各组小鼠关节炎指数和肺纤维化程度,以及肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症因子的表达水平,确定祛湿化痰除痹方对RA-ILD的治疗作用,并利用网络药理学分析祛湿化痰除痹方改善肺纤维化和关节炎的可能机制。结果 与对照组相比,CIA-BLM 模型小鼠关节明显肿胀、关节炎指数评分增加(P <0.05);经祛湿化痰除痹方治疗28天后,与CIA-BLM 组相比,祛湿化痰除痹方治疗组关节肿胀明显改善,关节炎指数评分下降(P <0.05)。与对照组相比,CIA-BLM 组不仅肺间质炎性细胞浸润增加,而且肺间质增殖,肺泡面积明显减少(P <0.05);与CIA-BLM 组相比,祛湿化痰除痹方治疗组肺间质炎性细胞浸润减少,肺间质增生明显改善,且呈剂量依赖性(P <0.05)。马松染色显示,与对照组相比,CIA-BLM 组肺间质蓝色胶原纤维明显增多(P <0.05);与CIA-BLM 组相比,祛湿化痰除痹方治疗组肺间质蓝色胶原纤维明显减少,且呈剂量依赖性(P <0.05)。天狼星红染色显示,与对照组相比,CIA-BLM 组肺间质红色胶原纤维明显增多(P <0.05);与CIA-BLM 组相比,祛湿化痰除痹方治疗组肺间质红色胶原纤维明显减少,且呈剂量依赖性(P <0.05)。免疫组化显示,与对照组相比,CIABLM组肺组织中TNF-α、IL-6及IL-1β的表达水平明显升高(P 均<0.05);而与CIA-BLM 组相比,CB-L组和CB-H 组中的TNF-α、IL-6及IL-1β的表达水平明显降低(P 均<0.05)。网络药理学分析进一步提示祛湿化痰除痹方作用于TNF-α和IL-17及其下游MAPK 通路发挥改善CIA-BLM 模型肺纤维化的作用。结论 祛湿化痰除痹方通过抑制炎症因子表达改善CIA-BLM 小鼠肺纤维化,网络药理学显示这可能与其抑制TNF-α和IL-17及其下游MAPK通路相关。 |